蜂蜜是蜜蜂從開(kāi)花植物的花中采得的花蜜，在蜂巢中釀制而成?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》把“石蜜、蜂子、蜜蠟”列為上品，指出其有“除百病、和百藥”的作用，且“多服久服不傷人”，可見(jiàn)蜂蜜的保健功能很早就被認(rèn)識(shí)到。隨著蜂蜜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，高附加值蜂蜜產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)成為一種趨勢(shì)。

　　蜂蜜酒是以蜂蜜加水稀釋后經(jīng)特殊工藝生產(chǎn)的發(fā)酵酒，含有多種人體必需的氨基酸、礦物質(zhì)和維生素，有極高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值;酒精含量在10%vol～14%vol，不含甲醇和甲醛;口感獨(dú)特，備受消費(fèi)者的青睞。因此，評(píng)估蜂蜜酒的生物學(xué)功效，并與其他市售同類(lèi)產(chǎn)品進(jìn)行比較，為蜂蜜酒的深入開(kāi)發(fā)奠定基礎(chǔ)。

　　腸道微環(huán)境主要包括4種屏障：微生物形成的生物屏障、腸黏膜免疫屏障、消化液及抑菌物質(zhì)等形成的化學(xué)屏障和上皮與細(xì)胞形成的機(jī)械屏障。本文主要研究生物屏障和腸黏膜免疫屏障，腸道表面定殖著大量的微生物，它們共同參與腸道吸收、免疫調(diào)節(jié)等過(guò)程，共同維持腸道的健康與平衡。腸黏膜堿性磷酸酶(AKP)是腸道吸收消化的標(biāo)志性酶類(lèi)物質(zhì)，與腸道微生物的組成和豐度存在密切關(guān)系，當(dāng)腸道中革蘭氏陰性菌多時(shí)，腸堿性磷酸酶活性增高，說(shuō)明腸道中潛在的致病菌多。此外腸黏膜免疫屏障中分泌型免疫球蛋白SIgA也會(huì)參與腸道免疫調(diào)節(jié)，抵御病原菌的侵害，防止腸道炎癥的產(chǎn)生，分泌型免疫球蛋白SIgA含量越高，說(shuō)明腸黏膜免疫屏障越強(qiáng)。

　　蜂蜜酒是由原蜂蜜經(jīng)微生物發(fā)酵而成的發(fā)酵酒，口感獨(dú)特，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，評(píng)估蜂蜜酒的功效對(duì)后續(xù)產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和蜂蜜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展有重要的意義。通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)比較了食用酒精、蜂蜜水和蜂蜜酒對(duì)小鼠生長(zhǎng)、腸道微生物和宿主免疫因子的影響。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期飲用低劑量蜂蜜酒對(duì)肝臟沒(méi)有損傷，同時(shí)能明顯提高小鼠食物轉(zhuǎn)化率，促進(jìn)腸道益生菌雙歧桿菌的生長(zhǎng)，對(duì)大腸桿菌有明顯的抑制作用，并能顯著降低腸堿性磷酸酶的活性，對(duì)腸黏膜免疫球蛋白SIgA也有顯著的促進(jìn)作用。因此蜂蜜酒能通過(guò)改善腸道微生物和腸道免疫來(lái)發(fā)揮保健功能。

　　結(jié)果與分析

　　蜂蜜酒對(duì)肝臟的影響

　　長(zhǎng)期過(guò)量飲酒會(huì)對(duì)肝臟造成損傷，通過(guò)對(duì)喂養(yǎng)30 d后小鼠的肝臟進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)蜂蜜水組、蜂蜜酒組的小鼠肝臟顏色鮮紅，柔軟有彈性，而陰性對(duì)照(酒精組)的小鼠肝臟顏色偏黃，有稍微的硬化。切片觀察發(fā)現(xiàn)，酒精組肝臟胞腔中出現(xiàn)大小不等的空泡，邊界清晰，屬于肝細(xì)胞脂肪變性，而其他處理組的肝臟細(xì)胞排列均勻，細(xì)胞核明顯，細(xì)胞與細(xì)胞間界限清晰，說(shuō)明蜂蜜酒對(duì)小鼠肝臟沒(méi)有明顯的影響。

　　蜂蜜酒對(duì)食物轉(zhuǎn)化率的影響

　　為探究不同處理組對(duì)小鼠生長(zhǎng)的影響，每5天記錄其飲食量和生長(zhǎng)情況。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，陰性對(duì)照組(酒精組)的小鼠食物轉(zhuǎn)化率明顯低于純凈水組，在第5天時(shí)兩者相差11.9%;而蜂蜜水組和蜂蜜酒組的小鼠食物轉(zhuǎn)化率明顯高于純凈水組，在第5天時(shí)差異最明顯。說(shuō)明酒精會(huì)降低小鼠的食物轉(zhuǎn)化率，影響其正常生長(zhǎng);而蜂蜜水和蜂蜜酒會(huì)增加食物轉(zhuǎn)化率以促進(jìn)生長(zhǎng)，可能是因?yàn)榉涿鬯头涿劬浦芯幸欢康臓I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和其他生物活性物質(zhì)，可以抵抗酒精對(duì)食物消化的負(fù)面作用。

　　蜂蜜酒對(duì)腸道微生物生長(zhǎng)的影響

　　為比較各種處理對(duì)小鼠腸道微生物的作用，通過(guò)活菌計(jì)數(shù)的方法檢測(cè)糞便中大腸桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌的含量，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，酒精組小鼠糞便中大腸桿菌的含量顯著升高(p<0.05)，而蜂蜜酒組大腸桿菌含量顯著下降(p<0.05)，說(shuō)明蜂蜜酒對(duì)腸道潛在致病菌(大腸桿菌)有顯著的抑制作用。酒精組小鼠糞便中雙歧桿菌含量顯著降低(p<0.05)，蜂蜜水組和蜂蜜酒組處理后雙歧桿菌含量極顯著升高(p<0.01)，說(shuō)明蜂蜜水和蜂蜜酒都能促進(jìn)腸道中雙歧桿菌的生長(zhǎng)。

　　就腸道中乳酸桿菌的變化而言，酒精組的乳酸桿菌生長(zhǎng)受到極顯著抑制(p<0.01)，而蜂蜜酒組的乳酸桿菌和純凈水組比較，沒(méi)有顯著的影響(p>0.05)，說(shuō)明蜂蜜酒對(duì)乳酸桿菌的含量沒(méi)有顯著影響。因此研究結(jié)果表明，蜂蜜酒有改善腸道微生物的作用。

　　蜂蜜酒對(duì)腸堿性磷酸酶活性的影響

　　為探究各種處理對(duì)小鼠腸堿性磷酸酶含量的影響，實(shí)驗(yàn)處理后取各組小鼠腸黏膜進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)(圖4)酒精組小鼠腸堿性磷酸酶活性顯著上升(p<0.05)，蜂蜜水組腸堿性磷酸酶活性沒(méi)有顯著變化(p>0.05)，而蜂蜜酒處理小鼠30 d后，AKP活性顯著性降低(p<0.05)。堿性磷酸酶是腸道消化吸收的關(guān)鍵酶，其活性與腸道病原菌的含量密切相關(guān)，當(dāng)其含量降低時(shí)，說(shuō)明腸道中病原菌受到抑制，炎癥產(chǎn)生概率小。因此飲用蜂蜜酒對(duì)腸道病原菌有一定的抑制作用。

　　蜂蜜酒對(duì)腸黏膜SIgA含量的影響

　　腸黏膜免疫球蛋白SIgA是腸道黏膜屏障的主要效應(yīng)因子，其含量升高說(shuō)明腸黏膜的穩(wěn)定性、免疫能力增強(qiáng)，抑制腸道炎癥和感染的發(fā)生，相反則說(shuō)明腸黏膜免疫處于抑制狀態(tài)，有損腸道健康。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，酒精組小鼠腸道SIgA含量顯著下降(p<0.05)，小鼠腸黏膜免疫力低下;而蜂蜜酒組腸黏膜SIgA有顯著提升(p<0.05)，說(shuō)明飲用蜂蜜酒能增強(qiáng)腸道免疫能力，抑制腸炎的產(chǎn)生，保護(hù)腸道。相比較而言，蜂蜜水對(duì)腸黏膜SIgA的促進(jìn)作用弱于蜂蜜酒，說(shuō)明蜂蜜水經(jīng)發(fā)酵后的產(chǎn)物——蜂蜜酒對(duì)宿主的保健能力更強(qiáng)。

　　討論

　　本實(shí)驗(yàn)通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)評(píng)估了蜂蜜酒對(duì)小鼠生理、腸道健康的影響，試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期飲用蜂蜜酒對(duì)肝臟沒(méi)有顯著的負(fù)面影響，同時(shí)還能提高小鼠的食物利用率，促進(jìn)生長(zhǎng)，提高免疫機(jī)能，具體原因可能包括以下幾點(diǎn)：

　　(1)研究表明，低劑量的酒精會(huì)增強(qiáng)腸道通透性，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收;但是，相同酒精濃度的酒精組的食物利用率卻很低，說(shuō)明酒精對(duì)小鼠生長(zhǎng)具有其他負(fù)作用，導(dǎo)致小鼠食物利用率低，而蜂蜜中含有抵抗酒精負(fù)面作用的生物學(xué)活性成分。

　　(2)蜂蜜水經(jīng)過(guò)釀造加工而成的蜂蜜酒保留了原有的益生成分，如氨基酸、礦物質(zhì)和維生素等，這些益生成分對(duì)腸道微生物具有改善作用，促進(jìn)有益菌生長(zhǎng)的同時(shí)抑制潛在致病菌。有益菌乳酸桿菌和雙歧桿菌在免疫調(diào)節(jié)、降低血液中膽固醇、產(chǎn)生代謝物抑制有害菌的侵染方面具有重要作用，而腸道中潛在致病菌大腸桿菌含量較高時(shí)會(huì)引起腸道炎癥的產(chǎn)生，導(dǎo)致腹瀉。腸道微生物的組成和相對(duì)豐度直接與腸道的消化吸收、免疫調(diào)節(jié)密切相關(guān)。因此，蜂蜜酒可以通過(guò)改善腸道微生物的組成促進(jìn)食物的消化吸收，增加食物利用率，促進(jìn)生長(zhǎng)。

　　(3)飲用蜂蜜酒增強(qiáng)腸道生物屏障和腸黏膜免疫功能。

　　其一，腸道微生物形成的生物屏障影響腸堿性磷酸酶的活性，而腸堿性磷酸酶參與腸道的消化吸收和免疫平衡的調(diào)節(jié)。正常菌群中存在大量的革蘭氏陰性菌，如大腸桿菌、變形桿菌等，這些陰性菌表面的脂多糖在腸道中的濃度也相對(duì)較高，當(dāng)其進(jìn)入血液循環(huán)時(shí)會(huì)誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生炎癥，甚至休克，而腸黏膜堿性磷酸酶會(huì)催化脂多糖去磷酸化，間接抑制炎癥反應(yīng)的發(fā)生，陰性菌含量越低，堿性磷酸酶活性越低，腸免疫能力越強(qiáng)。研究結(jié)果表明，蜂蜜酒處理小鼠后，大腸桿菌的含量顯著降低(p<0.05)，與此同時(shí)腸黏膜堿性磷酸酶的活性顯著下降(p<0.05)，該結(jié)果與前人研究結(jié)果一致，說(shuō)明蜂蜜酒對(duì)腸道具有保護(hù)作用。

　　其二，腸黏膜SIgA是腸道黏膜屏障的主要效應(yīng)因子，由漿細(xì)胞分泌產(chǎn)生，參與形成腸黏膜的穩(wěn)定性、防止腸道感染的發(fā)生。陳麗梅等研究發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌YK-1R飼養(yǎng)斷奶仔豬，能增加菌群多樣性及提高SIgA的分泌，增強(qiáng)腸道免疫能力，促進(jìn)生長(zhǎng)。賈玉臣等用瑞士乳酸桿菌灌胃小鼠，腸黏膜SIgA含量顯著升高，腸道免疫能力明顯增強(qiáng)，說(shuō)明SIgA顯著增高能提高腸道免疫功能，促進(jìn)腸道消化吸收，提高食物轉(zhuǎn)化率。

　　同時(shí)此前相關(guān)研究也證明SIgA的分泌與腸道微生物之間也存在密切的關(guān)系。腸道益生菌的定殖促進(jìn)了SIgA的分泌，而SIgA的分泌同時(shí)也會(huì)促進(jìn)益生菌的定殖，兩者相互作用，共同維持腸道健康，促進(jìn)生長(zhǎng)。本文試驗(yàn)結(jié)果也表明，蜂蜜酒能顯著改善腸道微生物的相對(duì)豐度，促進(jìn)有益菌雙歧桿菌、抑制潛在致病菌大腸桿菌的生長(zhǎng)，同時(shí)蜂蜜酒處理組的腸黏膜免疫球蛋白SIgA的含量也顯著增加(p<0.05)，與前人研究結(jié)果一致。因此蜂蜜酒可以通過(guò)提高腸道免疫功能，抵御病原菌入侵，促進(jìn)宿主健康。

　　綜上所述，蜂蜜酒可以通過(guò)改善腸道微生物和腸黏膜免疫來(lái)促進(jìn)宿主健康，與蜂蜜水相比而言對(duì)腸道保健效果更明顯。目前通過(guò)改善飲食來(lái)調(diào)理腸道微生物成為當(dāng)下維持健康生活狀態(tài)的首選方式，我們的研究工作為蜂蜜產(chǎn)業(yè)的深度開(kāi)發(fā)和蜂蜜酒的生產(chǎn)奠定理論基礎(chǔ)。